NO assay Protocol
이전의 항목은 Cell counting 항목 참조.
1. 96well plate에 well당 4x10^5 cell/mL 만큼 Seeding 해준다.
2. Raw 264.7 cell의 경우 1시간 뒤 LPS 10ppm을 처리해준다.
3. 다시 1시간 뒤 treatment를 처리를 해준다.(Raw 264.7 cell이 아닐 경우 seeding 후 2시간 뒤)
4. 실험에 따라 12h, 24h, 48h 후 well당 50uL를 옆이나 다른 96well plate에 옮긴다.
5. 그 후 빛이 없는 환경(암실)에서 각 Well당 50uL의 Grease를 첨가해준다.
6. 그 후 호일로 96well plate를 감싸 준 뒤 10분 후 540nm에서 read 해준다.
<96well plate>
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