실험 프로토콜/protein assay 썸네일형 리스트형 protein assay 기본상식 Protein assay 1. 단백질 정량이란 cell 등에서 protein isolation을 통해서 얻어낸 샘플의 단백질의 양 또는 농도를 구하는 과정으로 western bloting 등을 수행하기 위한 생물,화학적 기초작업이라고 할 수 있다 . 단백질 정량은 기초적인 작업이지만, 가장 중요한 작업(물론 모든 작업 중 하나라도 잘못되면 안되지만..)이라고 할 수 있다. 정량을 잘못하면 항체를 이용한 단백질 발현량 체크 등과 같은 실험을 할 때 잘못된 data를 얻기 때문이다. 특히나 western blot 같은 경우는 시간과 노력이 많이 드는 만큼 단백질 정량과정에서 오류가 생겼다면 ....크흠.. .흡광도를 이용하여 단백질을 정량하는 원리는 Beer-Lambert의 법칙에 따른 것이다. 용액에 의한.. 더보기 Protein assay Protein assay는 얻은 protein을 정량하기 위해 사용하는 실험법으로, Standard로 BSA 를 이용한다. 보통 protein isolation을 통해 얻은 protein solution에 protein이 얼마나 들어있는지 알 수 없으므로 protein assay를 사용하여 숫자로 나타내고 그래프로 정량곡선을 그려서 대략적인 단백질 함량을 얻어 낼 수 있다. 1. 스탠다드 제작을 위한 serial dilution을 준비한다. 예를 들어 각 튜브당 Sample a b c d e f 의 6개의 standard tube가 있다고 할 때 a 튜브에는 80ul BSA b,c,d,e,f 튜브에는 40ul PBS를 넣어준다. 그 뒤 a 튜브에서 40ul 를 취해서 b튜브에 옮.. 더보기 이전 1 다음
