Protein isolation protein isolation은 세포를 lysis 시켜서 세포의 단백질만을 얻어내는 실험법이다. 보통 western blot, SDS page 등을 하기 위해 사용한다. 1. 6well plate 에서 media 를 suction 해준 뒤, PBS로 washing 해주고 다시 suction 해준다. 2. 클린벤치에서 꺼낸 다음 200ul protein lysis buffer 를 각 well 당 처리해 주고 6well plate를 ice 위에 올려준다. 3. 그 다음 cell scraper 를 이용해서 well에 붙어 있는 cell 들을 모아 주고, EP tube에 옮겨준다. (ice 위에 올려둔 상태는 유지) 4. 샘플을 30초간 votex 해주고 10분간 ice 위에 .. 더보기 cDNA 만들기 *이전의 프로토콜은 RNA isolation 항목 참조 1. Nano drop 기계를 이용하여 분리해낸 RNA의 순도 및 함량을 측정한다. (아래 표는 나노드랍 시행 시 예시) A Abs Value Abs Value 260 2.645 OD 2116 ng/µl 260 2.5560001 OD 2044.8 ng/µl 280 1.4524 OD 1.82 ratio 280 1.4047 OD 1.82 ratio B Abs Value Abs Value 260 2.4766 OD 1981.28 ng/µl 260 OD ng/µl 280 1.3828 OD 1.79 ratio 280 OD ratio C Abs Value Abs Value 260 3.3081 OD 2646.48 ng/µl 260 OD ng/µl 280 3.395.. 더보기 Treatment 추출물이나 시약을 배지에 첨가하여 그 효능을 알아 보거나 원하는 결과를 이끌어 낼 때 자주 사용하는 방법. 보통 50 100 200 400 800ppm 까지 사용하며, 대부분의 물질이 800ppm 정도에서는 독성을 나타내므로 그 이상은 의미가 없다고 볼 수 있다. PPM(Part per million)이란 100만분율로, 어떤 물질 내에서 특정한 물질이 얼마나 들어가 있는지를 나타낼 때 사용한다. 예를 들어 식염수 1000g 중 식염을 10g 함유한 경우는 10/1000000 x 1000000 = 10ppm 이 된다. 만약 x 라는 추출물을 배지에 10000ppm 첨가하여 만들고 싶다면 배지 10ml 에 0.01g 추출물을 첨가하면 된다. 이 경우는 10ml = 0.01L 이고 0.01.. 더보기 이전 1 ··· 27 28 29 30 31 32 33 다음